細(xì)胞是構(gòu)建生命體的基礎(chǔ)，隨著科技的發(fā)展，細(xì)胞在生物制藥，生命科學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域也有著至關(guān)重要的地位。性能穩(wěn)定、活力旺盛、高產(chǎn)能的細(xì)胞株不僅可以起到簡(jiǎn)化生產(chǎn)工藝的作用，還能節(jié)約生產(chǎn)成本。CHO細(xì)胞是現(xiàn)代制藥企業(yè)進(jìn)行研發(fā)、生產(chǎn)常用一種細(xì)胞，那么CHO細(xì)胞家族到底有多大呢？有哪些分類(lèi)呢？需要如何選到合適的細(xì)胞細(xì)胞株進(jìn)行生產(chǎn)呢？

下面小編一起帶你來(lái)了解一下這個(gè)強(qiáng)大的家族吧。

CHO細(xì)胞的背景

CHO細(xì)胞是中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞（Chinese hamster ovary）的簡(jiǎn)稱(chēng)。

在民國(guó)時(shí)期1919年，北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院的E.T. Hsieh博士在進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究時(shí)，初次發(fā)現(xiàn)野生的中國(guó)倉(cāng)鼠的實(shí)驗(yàn)價(jià)值，于是進(jìn)行飼養(yǎng)研究，準(zhǔn)備訓(xùn)化它們成為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品系。后經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)馴養(yǎng)均失敗。直到1949年Victor Schwentker經(jīng)過(guò)兩年的馴養(yǎng)，成功地把它變成一種實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物的品系。

 1957年，Puck實(shí)驗(yàn)室通過(guò)組織酶解消化技術(shù)成功分離出CHO細(xì)胞株，次年經(jīng)過(guò)連續(xù)傳代細(xì)胞重新克隆后建立完整的CHO原始細(xì)胞系。

  起初的CHO細(xì)胞系在培養(yǎng)時(shí)需要添加proline（脯氨酸）才能良好生長(zhǎng)，雖然CHO細(xì)胞后來(lái)流轉(zhuǎn)到各生物公司進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究，但始終保留了脯氨酸缺陷型這一特性。

由于不同的實(shí)驗(yàn)環(huán)境及篩選培養(yǎng)方式的不同，CHO細(xì)胞在細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)方式、表達(dá)方式、基因組、新陳代謝等方面也出現(xiàn)了差異化,逐漸演變成許多不同的細(xì)胞系。

CHO細(xì)胞的分類(lèi)

目前常用的CHO細(xì)胞系主要有以下幾種：

CHO-K1是1970由Puck實(shí)驗(yàn)室通過(guò)原始CHO細(xì)胞系進(jìn)行亞克隆存放于ATCC（CCL-61）系列中。

隨后在1985年通過(guò)ATCC CHO-K1亞克隆被分離并保存于ECACC（85051005）中，此時(shí)細(xì)胞系開(kāi)始用于制藥或重組蛋白的表達(dá)。CHO-K1細(xì)胞系的培養(yǎng)方式采用的是貼壁培養(yǎng)，并且需要在培養(yǎng)基中添加血清，才能保證細(xì)胞良好生長(zhǎng)。

后來(lái)Lonza生物公司將ECACC CHO-K1通過(guò)多年改造訓(xùn)化，建立CHO K1SV（Lonza，2002）細(xì)胞株使其適應(yīng)無(wú)血清培養(yǎng)基懸浮培養(yǎng)，被廣泛應(yīng)用在GS表達(dá)平臺(tái)。

Merck公司在2006年通過(guò)ECACC獲得CHO-K1細(xì)胞株，并進(jìn)行懸浮馴化建立了CHOZN CHO K1（Merck，2006）細(xì)胞株，該細(xì)胞株可以生長(zhǎng)在化學(xué)成分限定培養(yǎng)基中，降低了培養(yǎng)成本?；?/span>CHO-K1的細(xì)胞系主要采用的蛋白篩選系統(tǒng)為GS（谷氨酰胺合成酶）和抗生素篩選系統(tǒng)在篩選效率上也有所提高。目前多個(gè)已經(jīng)上市的治療性蛋白多數(shù)是基于CHO-K1細(xì)胞進(jìn)行開(kāi)發(fā)生產(chǎn)的。

Thompson實(shí)驗(yàn)室在1973年通過(guò)原始CHO細(xì)胞系 分離并建立CHO-S細(xì)胞株，后Gibco公司將該細(xì)胞株馴化至CD CHO培養(yǎng)基中并建立了GMP細(xì)胞庫(kù)，由于CHO-S因可以在無(wú)血清培養(yǎng)基中高密度懸浮培養(yǎng)，所以在早期常多用用瞬時(shí)表達(dá)宿主細(xì)胞。

除以上常用細(xì)胞外，還有單DHFR基因被敲除的CHO-DXB11細(xì)胞株也常用作宿主細(xì)胞；

Chasin實(shí)驗(yàn)室生產(chǎn)的CHO-DG44細(xì)胞株；

后來(lái)Lonza公司也于2012年推出CHO細(xì)胞 的GS雙等位基因敲除的CHOK1SV GS-KO細(xì)胞株。進(jìn)一步提升了篩選效率，縮短了穩(wěn)定細(xì)胞株的開(kāi)發(fā)周期，使細(xì)胞的克隆生產(chǎn)穩(wěn)定性得以增強(qiáng)。

蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專(zhuān)注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年，擁有專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系，目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)，涵蓋各大高校、檢測(cè)中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個(gè)群體。提供的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀，瑞寧移液器，生物反應(yīng)器，發(fā)酵罐，超低溫冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機(jī)，天平，離心機(jī)，離心濃縮儀、研磨機(jī)、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂(lè)楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個(gè)余廠家。