HEK細胞系是動物細胞培養(yǎng)中常見的一種細胞系,那么 HEK293和293t細胞有區(qū)別嗎?
什么是 HEK293?
HEK293 是一種永生化細胞系,來源于人胚胎腎臟,用剪切的人腺病毒 5 型 DNA 轉染以產(chǎn)生許多重組蛋白。HEK293 剛開始是由荷蘭生物學家 Alex Van der Eb 于 1973 年從人類腎臟細胞中分離出來的。這些細胞是在女性胎兒的組織培養(yǎng)物中生長的。后來,Van der Eb 實驗室的博士后研究員 Frank Graham 對它們進行了剪切的人類腺病毒 5 型 DNA 轉染。該細胞系之所以被命名為HEK293,是因為這是弗蘭克的第293次實驗。
將腺病毒基因整合到 HEK 細胞基因組中,使這些細胞能夠非常有效地產(chǎn)生大量重組蛋白。此外,腺病毒載體含有CMV啟動子區(qū);因此,它進一步提高了效率。該細胞系已被用作基因表達研究的宿主。
什么是 HEK293t?
HEK293t是源自HEK293原始細胞系的子代細胞系,轉染攜帶SV40復制起點的質粒載體,產(chǎn)生大量重組蛋白。HEK293t 是一種表達 SV40 大 T 抗原突變體的人類細胞系。HEK293t 是在斯坦福大學 Michele Carlos 的實驗室通過穩(wěn)定轉染 HEK29E 細胞系和編碼 SV40 大 T 抗原的溫度敏感突變體的質粒而創(chuàng)建的。它初被稱為 293/tsA1609neo。這是因為轉染用于創(chuàng)建賦予新霉素抗性和 SV40 大 T 抗原的 tsA 1609 等位基因表達的細胞系。
由于 SV40 大 T 抗原的突變版本的表達,具有 SV 40 復制起點的轉染質??梢源蟠笤黾又亟M蛋白的量。該細胞系通常用于生物技術行業(yè)的蛋白質表達和重組逆轉錄病毒的生產(chǎn)。
HEK293 和 HEK293t 的相同之處
轉染通常被定義為將外來DNA和RNA引入細胞以影響其基因型和表型的過程。通過各種生物、化學和物理方法引入外來核酸可以改變細胞的特性。這允許在細胞環(huán)境中研究基因功能和蛋白質表達。HEK293 和 HEK293t 是兩種細胞系,由于它們具有轉染傾向,多年來在細胞生物學研究中得到廣泛應用。
HEK293 和 HEK293t 是兩種細胞系,由于它們具有轉染傾向,因此被廣泛用于細胞生物學研究,兩者的相同之處在于:
兩種細胞系都是實驗室衍生的。
這些細胞系可以大大增加重組蛋白的產(chǎn)量。
它們是通過用質粒載體轉染胚胎人腎細胞制成的。
(下圖為:293T細胞)
HEK293 和 HEK293t 的區(qū)別
HEK293 是一種永生化細胞系,來源于人類胚胎腎臟,該腎臟被剪切的人類腺病毒 5 型 DNA 轉染。相反,HEK293t 是源自 HEK293 原始細胞系的子細胞系,該細胞系轉染了攜帶 SV40 復制起點的質粒載體。因此,這是 HEK293 和 HEK293t 之間的主要區(qū)別。此外,HEK293 不表達 SV40 大 T 抗原的突變版本。另一方面,HEK293t 表達 SV40 大 T 抗原的突變版本。
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