實(shí)驗(yàn)材料：

基礎(chǔ)培養(yǎng)基（液體或干粉）                PET/PETG方形試劑瓶[NEST]

血清（常規(guī)為FBS/NBS）                   補(bǔ)充劑

移液槍                                              電動移液槍

15mL、50mL無菌離心管[NEST]        滅菌超純水                     

盒裝無菌吸頭[NEST]                          血清移液管[NEST]

超凈工作臺                                        雙抗（青鏈霉素混合液）

杯式濾器(0.22μm PES膜) [NEST]       針式濾器 (0.22μm PES膜) [NEST]    

實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：

血清準(zhǔn)備：

配置培養(yǎng)基前一天，將所需血清從-20℃冰庫取出，放置入2-8℃冰箱緩慢解凍儲存，使用前37℃水浴加熱。

培養(yǎng)基準(zhǔn)備：

液體基礎(chǔ)培養(yǎng)基使用前37℃水浴加熱。

實(shí)驗(yàn)流程：

基礎(chǔ)培養(yǎng)基配置（干粉）：

根據(jù)配置體積，選擇合適的滅菌后容器，在容器中倒入約90%體積的超純水，將培養(yǎng)基干粉全部倒入該容器中，用少量超純水將袋內(nèi)殘留粉末洗出。

攪拌30min使所有成分完全溶解，待溶液澄清后，根據(jù)說明書加入適當(dāng)量的碳酸氫鈉（分析純），繼續(xù)攪拌5-10min至溶解，隨后超純水定容并調(diào)節(jié)PH值。(過濾會使培養(yǎng)基PH值稍微偏高，所以用1mol/L氫氧化鈉溶液或1mol/L鹽酸溶液調(diào)整PH值至7.20-7.30）

使用0.22μm杯式濾器[NEST]或0.22μm針式濾器[NEST]過濾除菌，并按照日常使用規(guī)格分裝入PET/PETG方形試劑瓶[NEST]中，2-8℃條件下避光保存?zhèn)溆谩！揪鷻z合格后方可使用】

培養(yǎng)基配置：

若含有補(bǔ)充劑，用1000μL無菌吸頭[NEST]取出適量預(yù)熱完成的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，注入補(bǔ)充劑西林瓶中，將其充分溶解，再將含有補(bǔ)充劑的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。

接著按照血清使用比例，用血清移液管[NEST]吸取適量預(yù)熱完成的血清，注入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，蓋上瓶蓋充分混勻。

雙抗加入：

除了特殊篩選系統(tǒng)外，一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下，培養(yǎng)基中不添加任何抗生素。若為防止細(xì)菌、真菌污染，或懷疑細(xì)胞污染需要清除細(xì)菌，可以加入青霉素-鏈霉素雙抗溶液，其培養(yǎng)基中的終濃度為青霉素100U/ml，鏈霉素為100ug/ml。

培養(yǎng)基保存：

將配置后的完全培養(yǎng)基2-8℃條件下，避光保存?zhèn)溆?；或按照使用需求分裝入對應(yīng)規(guī)格的PET/PETG方形試劑瓶[NEST]中。隔夜或1-2天后觀察完全培養(yǎng)基，溶液澄清通透且無染菌，方可使用。

使用多余的血清，按照剩余量，可分裝入15mL/50mL的無菌離心管[NEST]中（防止血清凍存后膨脹泄露問題，離心管工作體積建議為80%），亦可分裝入合適規(guī)格的PET/PETG方形試劑瓶[NEST]中，并用封口膜封口，-20℃條件下避光保存。

使用到的NEST產(chǎn)品：

15mL、50mL無菌離心管[NEST]            PET/PETG方形試劑瓶[NEST]

盒裝無菌吸頭[NEST]                            血清移液管[NEST]

杯式濾器(0.22μm PES膜) [NEST]          針式濾器 (0.22μm PES膜) [NEST]                    

蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年，擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系，目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)，涵蓋各大高校、檢測中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個(gè)群體。提供的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀，瑞寧移液器，生物反應(yīng)器，發(fā)酵罐，超低溫冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機(jī)，天平，離心機(jī)，離心濃縮儀、研磨機(jī)、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個(gè)余廠家。