標簽：生物反應器  細胞培養(yǎng) 

懸浮細胞培養(yǎng)是動物細胞培養(yǎng)的主要方法，廣泛適用于淋巴細胞、髓質(zhì)腫瘤細胞、與其他細胞融合得到的髓質(zhì)腫瘤細胞、淋巴瘤細胞、白血病細胞、白細胞、肥大細胞、肝癌細胞等，中空纖維生物反應器對動物細胞進行懸浮培養(yǎng)也是細胞規(guī)模化生產(chǎn)常見的培養(yǎng)方式。

一、中空纖維生物反應器懸浮培養(yǎng)技術

中空纖維生物反應器培養(yǎng)是由一個外殼和多個封閉在殼的中空纖維所組成的生物反應器，其中空纖維管一般由聚砜或聚醚砜所制成，孔徑約為10 2 A~5×10 4 A之間，適宜培養(yǎng)懸浮的動物細胞主要包括髓質(zhì)腫瘤細胞、白血病細胞、淋巴細胞等。細胞接種濃度以10 5至5×10 6細胞/ml為宜。

二、中空纖維生物反應器懸浮細胞培養(yǎng)有哪些優(yōu)勢 ?

動物細胞包括貼壁增殖細胞和在懸浮狀態(tài)下生長、增殖的懸浮細胞。目前已知有多種培養(yǎng)動物細胞的方法。即貼壁培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)。

與附著細胞相比，懸浮細胞通常較弱。實踐證明，懸浮細胞的難以高密度生長和增殖。所以，培養(yǎng)懸浮細胞的方法主要有靜止懸浮培養(yǎng)法和使用攪拌、旋轉(zhuǎn)攪拌等的懸浮培養(yǎng)法。

然而，這些方法的缺點在于：

(1)需要大型設備，因為細胞難以高密度生長和增殖；

(2) 將細胞與營養(yǎng)物質(zhì)、代謝產(chǎn)物、廢物等分離時比較困難；

(3)難以連續(xù)更換培養(yǎng)基；

(4)被其他微生物污染的可能性大。

中空纖維生物反應器技術可以為懸浮的動物細胞提供一種有效的細胞懸浮培養(yǎng)單元。當培養(yǎng)懸浮的動物細胞時，在細胞培養(yǎng)單元中，該單元包括外殼和封閉在外殼中的開口中空纖維，位于外殼和中空纖維之間的空間中，通過使培養(yǎng)基流過外殼內(nèi)部中空纖維，懸浮的細胞就可以高密度生長和增殖。實驗中發(fā)現(xiàn)，中空纖維的孔徑在約 20 埃至 10 5埃的范圍內(nèi)，但當中空纖維的孔徑在 10 2埃~5×10 4 A，懸浮細胞以更高的密度生長和增殖。其原因主要在于，培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的交換和細胞內(nèi)代謝產(chǎn)物和廢物的交換進行得較為順利，產(chǎn)生了有利于細胞生長和增殖的環(huán)境。中空纖維生物反應器懸浮培養(yǎng)技術普遍適用于懸浮的動物細胞，并且該方法在通過與其他細胞的細胞融合獲得的懸浮細胞的增殖中也產(chǎn)生了不錯的效果。

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