標(biāo)簽：生物反應(yīng)器，細(xì)胞培養(yǎng)，微載體，接種，實驗方法 

Vero細(xì)胞近年來作為新時代制藥產(chǎn)業(yè)的熱門細(xì)胞，成為轉(zhuǎn)基因、蛋白、抗體類制藥企業(yè)普遍使用使用的載體工具。使用細(xì)胞生物反應(yīng)器進(jìn)行Vero細(xì)胞的規(guī)?；鲋车慕臃N工藝如下：

一、實驗前準(zhǔn)備：

細(xì)胞∶Vero 細(xì)胞（ATCC級別的 ）、DMEM培養(yǎng)基(Hyclone)、新生牛血清、抗生素、除菌濾膜、CT-3微載體、2L實驗室生物反應(yīng)器，5L搏旅細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、水浴鍋。

二、接種實驗方法

1.微載體的預(yù)處理和滅菌： 接種實驗前的微載體需要用無鈣、鎂離子的PBS磷酸鹽緩沖液進(jìn)行吸脹、洗滌，之后進(jìn)行高壓滅菌處理，工藝控制參數(shù)為：吸脹質(zhì)量濃度不超過50 g·L-1，滅菌溫度121 ℃，20 min。

2.轉(zhuǎn)瓶接種操作：

將培養(yǎng)瓶內(nèi)的 Vero 細(xì)胞接種于500ML的轉(zhuǎn)瓶內(nèi)，CT-3 微載體濃度為 3g/L，并加入適量的混合牛血清的DMEM培養(yǎng)基，此時接種密度以2.0×10°cells/mL為宜。

在微載體細(xì)胞生長過程中，可適當(dāng)補(bǔ)加微載體 2g/L，使微載體濃度達(dá)到 5g/L即可接種在5L細(xì)胞培養(yǎng)生物反應(yīng)器中作為種子細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。

3.規(guī)模擴(kuò)培接種操作

（4）當(dāng)細(xì)胞生長到達(dá)指定密度時，將細(xì)胞及新的微載體一起轉(zhuǎn)入大容積的微載體培養(yǎng)養(yǎng)反應(yīng)器中，進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。此過程的工藝參數(shù)為：溫控： 37士0.1℃，溶解氧為 50%空氣飽和度，攪拌器的轉(zhuǎn)速維持在20～32 r/min即可。當(dāng)細(xì)胞密度達(dá) 1.1×10'cells/mL時，即可進(jìn)入下游環(huán)節(jié)進(jìn)行產(chǎn)品生產(chǎn)。

  介于國外生物反應(yīng)器成本高昂，售后服務(wù)不便，型號固定、貨期長等因素，我國自主研發(fā)設(shè)備生產(chǎn)的生物反應(yīng)器目前已廣泛應(yīng)用于制藥生產(chǎn)、新藥開發(fā)、蛋白研發(fā)、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品等環(huán)節(jié)，一些國內(nèi)生物反應(yīng)器專業(yè)生產(chǎn)商甚至可根據(jù)客戶要求的尺寸進(jìn)行定制化操作,比如搏旅除生產(chǎn)固定型號規(guī)格外，還可以根據(jù)客戶要求定制不同級別、規(guī)格的生物反應(yīng)器、發(fā)酵罐主要用于微生物培養(yǎng)、種子制備、浮細(xì)胞培養(yǎng)、貼壁細(xì)胞培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)等，實現(xiàn)了廠商直供，一罐多用，滿足不同的用戶需求。蘇州阿爾法生物13年專注于生物實驗室儀器設(shè)備與實驗室試劑耗材的專業(yè)供應(yīng)，實驗室儀器中所供應(yīng)的生物反應(yīng)器可用于灌流培養(yǎng)、固定床式培養(yǎng)、攪拌通氣式培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、貼壁培養(yǎng)等多種細(xì)胞培養(yǎng)工藝。在細(xì)胞培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)、生物制藥等領(lǐng)域被廣泛應(yīng)用，同時我們還提供細(xì)胞培養(yǎng)基、血清、培養(yǎng)添加劑、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿、搖瓶等細(xì)胞培養(yǎng)類的試劑耗材 。同時還提供提供免費(fèi)的實驗室設(shè)備安裝服務(wù)、免費(fèi)技術(shù)支持、免費(fèi)操作指導(dǎo)等服務(wù)。如需了解更多，請0512-62956104或  18934597460進(jìn)行咨詢。

蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團(tuán)隊專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年，擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊與完善的售后服務(wù)體系，目前已為300余家實驗室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)，涵蓋各大高校、檢測中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個群體。提供的實驗室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀，瑞寧移液器，生物反應(yīng)器，發(fā)酵罐，超低溫冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機(jī)，天平，離心機(jī)，離心濃縮儀、研磨機(jī)、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個余廠家。