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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司

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細(xì)胞凍存液-細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)有哪些
信息摘要:
HyCyte 快速 細(xì)胞凍存液,不僅能降低凍存過(guò)程對(duì)細(xì)胞膜的損傷,維持高的細(xì)胞復(fù)蘇率;同時(shí)所有成分純度高化學(xué)特性穩(wěn)定,適用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(…

在細(xì)胞學(xué)研究中,為了方便長(zhǎng)期保存和傳播細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)和臨床應(yīng)用,常常需要采用冷凍存儲(chǔ)的方法。冷凍存儲(chǔ)是一種使細(xì)胞在極低溫度下安全保存的方法,一般使用液氮作為冷凍介質(zhì)。本文將介紹冷凍存儲(chǔ)的一般原則、技術(shù)要點(diǎn)以及注意事項(xiàng)。

QuickFreezing-M 細(xì)胞凍存液

一、冷凍存儲(chǔ)的原則與技術(shù)要點(diǎn)
1. 采用慢凍存融的方法:為了保持細(xì)胞的最大存活率,通常采用慢凍存融的方法。這意味著在冷凍和解凍過(guò)程中要逐漸降低或提高溫度,以避免快速的溫度變化對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生不利影響。
2. 控制冷凍速度:冷凍物距離液氮面越近溫度越低,采用標(biāo)準(zhǔn)的低凍速度約為-1℃~12℃/分鐘。當(dāng)溫度下降至-25℃時(shí),下降速度可增至-5℃~-10℃/分鐘;到達(dá)-100℃時(shí),則可迅速凍結(jié)在液氮中。冷凍物下降速度過(guò)快會(huì)影響細(xì)胞內(nèi)水分透出,過(guò)慢則可能促進(jìn)冰晶的形成。因此,在冷凍物下降入液氮中時(shí),要適當(dāng)掌握凍存物下降的速度。
3. 監(jiān)測(cè)冷凍速度:對(duì)于初次凍存者,在下降凍存時(shí),宜先用細(xì)木棒或其他工具伸入罐中,探測(cè)液面位置。同時(shí),使用溫度計(jì)與凍存物并行,以觀測(cè)下降凍存物的速度、凍存物與液氮液面距離以及溫度之間的關(guān)系。當(dāng)熟練掌握這些參數(shù)和凍存技術(shù)后,可以僅依據(jù)下降時(shí)間和下降距離來(lái)獲得理想的凍存效果。
4. 不同細(xì)胞對(duì)冷凍速度的要求不同:不同類(lèi)型的細(xì)胞對(duì)冷凍速度的要求也不一樣。一般而言,上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的耐受性較大,適宜的下降速度為-2℃~-3℃/分鐘;而胚胎細(xì)胞的耐受性較小,不宜太快。初次冷凍時(shí),下降速度不應(yīng)超過(guò)-10℃/分鐘。

5. 選擇合適的防護(hù)劑:合適的防護(hù)劑和使用的量應(yīng)根據(jù)細(xì)胞的需求而定。對(duì)于初代培養(yǎng)細(xì)胞,使用二甲基亞砜(DMSO)較為常見(jiàn);而一般細(xì)胞可使用甘油。防護(hù)劑的使用量應(yīng)盡量較小。有研究指出,人皮膚上皮細(xì)胞在20%-30%甘油中保存效果較好。


“QuickFreezing-I 昆蟲(chóng)細(xì)胞凍存液

二、冷凍存儲(chǔ)的注意事項(xiàng)
1. 定期復(fù)蘇培養(yǎng):原則上,細(xì)胞在液氮中可以保存多年。然而,為了確保細(xì)胞的存活和質(zhì)量,建議在冷凍存儲(chǔ)一年后,再進(jìn)行一次復(fù)蘇培養(yǎng)。這樣可以檢驗(yàn)細(xì)胞的活性,并提高后續(xù)凍存的成功率。

2. 安全防護(hù):在將凍存管放入或取出液氮容器時(shí),要注意自身的安全,避免凍傷。同時(shí),對(duì)于來(lái)自人源性或病毒感染的細(xì)胞株,應(yīng)特別小心。操作過(guò)程中,應(yīng)避免產(chǎn)生氣溶膠,小心使用有毒性試劑如DMSO,并避免尖銳物品傷人等。


一步細(xì)胞凍存液


舉一個(gè)實(shí)驗(yàn)案例,幫助我們更好地理解冷凍存儲(chǔ)的過(guò)程和相關(guān)原理。
小明是一名生物學(xué)研究生,他在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行一項(xiàng)關(guān)于白血病治療的研究。為了長(zhǎng)期保存重要的白血病細(xì)胞株,小明需要利用冷凍存儲(chǔ)的技術(shù)。
開(kāi)始小明按照實(shí)驗(yàn)室的冷凍存儲(chǔ)規(guī)范,準(zhǔn)備好冷凍介質(zhì)和凍存管。他選擇了DMSO,根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型和需求添加適量的甘油。然后,小明將白血病細(xì)胞株分散均勻,并加入冷凍介質(zhì)中。(其實(shí)直接使用細(xì)胞凍存液就可以)
接下來(lái),小明使用細(xì)木棒探測(cè)液面位置,并使用溫度計(jì)監(jiān)測(cè)冷凍速度。在逐漸降溫的過(guò)程中,小明注意觀察細(xì)胞與液氮液面距離和溫度的變化。通過(guò)掌握這些參數(shù),小明熟練地完成了細(xì)胞的冷凍存儲(chǔ)。
為了確保細(xì)胞的長(zhǎng)期保存和質(zhì)量,小明在冷凍存儲(chǔ)一年后,決定進(jìn)行一次復(fù)蘇培養(yǎng)。他從液氮容器中取出凍存管,小心地防止凍傷。經(jīng)過(guò)合適的復(fù)蘇培養(yǎng)條件,白血病細(xì)胞株成功復(fù)蘇,并保持了原有的活性和特性。

通過(guò)冷凍存儲(chǔ)的技術(shù),小明成功地保存了重要的白血病細(xì)胞株,為未來(lái)的實(shí)驗(yàn)和研究提供了可靠的資源。

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由此可見(jiàn),冷凍存儲(chǔ)是一項(xiàng)重要的細(xì)胞保存技術(shù),需要根據(jù)不同細(xì)胞類(lèi)型和要求掌握相應(yīng)的冷凍速度和防護(hù)劑使用。另外,定期復(fù)蘇培養(yǎng)可以保證細(xì)胞的存活和質(zhì)量。在操作過(guò)程中,要注意安全防護(hù),避免引起凍傷和其他意外事故。冷凍存儲(chǔ)技術(shù)的應(yīng)用將為生物學(xué)研究和臨床治療提供便利和可靠的細(xì)胞資源。

HyCyte  快速  細(xì)胞凍存液    一步凍存液特點(diǎn):

  1. 無(wú)需程序降溫,-80°C一步凍存

  2. 無(wú)血清、無(wú)任何蛋白

  3. 高復(fù)蘇率>90%

  4. 不影響干細(xì)胞的特性,細(xì)胞增殖不改變、細(xì)胞分化不改變

  5. 使用簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性高

  6. 可以直接使用,無(wú)需任何操作


HyCyte 快速 細(xì)胞凍存液,不僅能降低凍存過(guò)程對(duì)細(xì)胞膜的損傷,維持高的細(xì)胞復(fù)蘇率;同時(shí)所有成分純度高化學(xué)特性穩(wěn)定,適用于各種動(dòng)物細(xì)胞株(腫瘤細(xì)胞和常規(guī)細(xì)胞)的長(zhǎng)期凍存。 產(chǎn)品配方,無(wú)動(dòng)物性蛋白,無(wú)血清,可避免動(dòng)物蛋白的污染,細(xì)胞凍存10年以上的均能安全穩(wěn)定復(fù)蘇。產(chǎn)品省去繁瑣費(fèi)時(shí)的程序降溫過(guò)程,直接重懸細(xì)胞后置于-80°C冰箱即可完成凍存。該凍存液含有飽和脂肪酸和多糖、抗氧化等各種特殊成分,能夠提高長(zhǎng)期凍存細(xì)胞的存活率和復(fù)蘇活力,適合于無(wú)血清培養(yǎng)細(xì)胞和蛋白表達(dá)細(xì)胞株庫(kù)存。

| 質(zhì)量保證

經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的無(wú)菌檢測(cè)、滲透壓、pH 檢驗(yàn)和內(nèi)毒素,確保產(chǎn)品不含細(xì)菌、真菌、支原體及病毒等。

常規(guī)細(xì)胞凍存,細(xì)胞存活率高于90%。

| 運(yùn)輸保存 

常溫運(yùn)輸,2~8℃長(zhǎng)期保存,有效期12個(gè)月。 




蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年,位于蘇州園區(qū)生物納米園(Biobay)A5幢301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年,擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系,目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),涵蓋各大高校、檢測(cè)中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個(gè)群體。提供的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱,恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀,瑞寧移液器,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,超低溫冰箱,液氮罐,高壓滅菌器,超純水機(jī),天平,離心機(jī),離心濃縮儀、研磨機(jī)、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱,梅特勒,樂(lè)楓,搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個(gè)余廠家。

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