由于細(xì)胞培養(yǎng)的要求條件相對(duì)較高,近年來(lái),生物反應(yīng)器在細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模化中起著重要作用。因?yàn)橛梦⑤d體細(xì)胞生物反應(yīng)器培養(yǎng)技術(shù)具有表面積/體積(S/V)大,單位體積培養(yǎng)液的用量小,培養(yǎng)基利用率較高而且細(xì)胞的收獲過(guò)程相對(duì)容易等多項(xiàng)優(yōu)點(diǎn),所以,在實(shí)驗(yàn)室備廣泛使用。
我們知道,細(xì)胞的培養(yǎng)環(huán)境要比微生物的培養(yǎng)條件繁雜的多,平時(shí)如果大規(guī)模地培養(yǎng)細(xì)胞,那么周圍環(huán)境的溫度,培養(yǎng)基濃度,細(xì)胞敏感性、氧傳遞等對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)都具有決定性因素,而微載體生物反應(yīng)器可以為細(xì)胞的微載體培養(yǎng)提供良好的外在環(huán)境。
目前市場(chǎng)上很多微載體培養(yǎng)系統(tǒng)的生物反應(yīng)器都可以實(shí)行計(jì)算機(jī)操控,比如:攪拌槳的轉(zhuǎn)速,細(xì)胞懸浮均勻度、環(huán)境溫度變化、PH溶氧比例、細(xì)胞罐壓力、培養(yǎng)體積和通氣量等全程自動(dòng)化管理。因此,用生物反應(yīng)器系統(tǒng)進(jìn)行微載體細(xì)胞可以有效提高細(xì)胞的擴(kuò)增力。
目前,實(shí)驗(yàn)室中所采用的大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的生物反應(yīng)器系統(tǒng)主要有4種類型:
如攪拌式生物反應(yīng)器系統(tǒng)、旋轉(zhuǎn)式生物反應(yīng)器系統(tǒng)以及灌注式生物反應(yīng)器系統(tǒng)等。
1、攪拌式生物反應(yīng)器
攪拌式生物反應(yīng)器一般采購(gòu)費(fèi)用較低,簡(jiǎn)單易操作,使用方便。也是市場(chǎng)上目前用的較多的生物反應(yīng)器。搏旅的不銹鋼微載體生物反應(yīng)器就屬于此類反應(yīng)器。在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域也發(fā)揮重要作用,比如醫(yī)學(xué)上肝細(xì)胞大規(guī)模擴(kuò)增培養(yǎng)研究使用的就是此類生物反應(yīng)器。它的缺點(diǎn)是它的剪切力過(guò)大,對(duì)某些剪切力反應(yīng)明顯的細(xì)胞,會(huì)增加培養(yǎng)難度。所以不適用于對(duì)剪切力敏感的細(xì)胞。
2、灌注式生物反應(yīng)器
細(xì)胞的灌注培養(yǎng)時(shí)當(dāng)今研究熱點(diǎn)之一。其操作方法是:不斷地加入新的培養(yǎng)基以并抽走含細(xì)胞代謝廢物的消耗培養(yǎng)基,使細(xì)胞在穩(wěn)定的環(huán)境中完成擴(kuò)增國(guó)成方法,用這樣的方法可以提高細(xì)胞的密度。
3、旋轉(zhuǎn)式生物反應(yīng)器
旋轉(zhuǎn)式生物反應(yīng)器,簡(jiǎn)稱RCCS。能用于微載體的大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng),又能培育細(xì)胞與支架形成的三維空間復(fù)合體。這種反應(yīng)器目前尚未上市推廣。
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