原代細胞是什么？為什么要使用原代細胞？   

    基于細胞的實驗在生命科學、生物醫(yī)學和藥物研究的突破中發(fā)揮著關鍵作用。實驗和分析依賴于一個優(yōu)越的細胞培養(yǎng)系統(tǒng)和細胞類型的仔細選擇。直接從組織中分離出來的原代細胞類似于正常的生理機能，并且缺乏與永生化的、基因改變的細胞系相關的修飾。這些被小心地從組織中去除并分離，然后在受控的培養(yǎng)環(huán)境中成為一個生長、健康的細胞群。

     適當分離的原代細胞應具有低傳代和穩(wěn)定性，具有高活力、轉染效率和加倍。分離后，這些細胞可以被膨脹、冷凍、記錄和測試。研究人員可以從許多獨特的人類和動物細胞類型中進行選擇，有不同的大小和包裝配置，包括新鮮分離、培養(yǎng)、增殖或低溫保存的細胞。凍存管、微孔板、燒瓶或易于使用的總試劑盒提供了進一步的選擇。組織和細胞也可以從同一供體中匹配地分離出來。

原代細胞與細胞系相比有哪些優(yōu)勢？

永生化細胞系在生命科學研究中肯定占有重要的地位。然而，對于特定的應用和研究方案，它們可能與假陽性和假陰性、與培養(yǎng)基的次優(yōu)配對、誤導性的細胞生長以及由于細胞系固有的基因改變而導致的錯誤數(shù)據(jù)相關聯(lián)。與原代細胞相比，永生化細胞系具有重要的表型差異，并可能因修飾和傳代而失去生理特性。如果在原代細胞和體內的研究沒有得到證實，那么有時只使用永生化細胞系的實驗室就會承擔風險。

在實驗室中分離原代細胞與購買原代細胞

   許多人的研究生涯開始于實驗室準備細胞，使用各種可用的技術和材料。對于典型的實驗室來說，成功地從組織中分離出原代細胞需要大量的時間、金錢、設備、培養(yǎng)器、培養(yǎng)基、試劑、人力資源和培訓，即使如此，方案和結果也各不相同，細胞也容易受到污染。此外，大量生產的、一般使用的培養(yǎng)基并沒有針對單個原代細胞類型的獨特要求進行優(yōu)化。細胞培養(yǎng)方法可以有很大的不同，這 取決于個人、實驗室、材料、試劑、細胞培養(yǎng)塑料，甚至溫度、濕度、一年時間和暖通空調系統(tǒng)！這些變量經常導致數(shù)據(jù)不一致、意外成本、重復和項目延遲。在被污染或自己嘗試進行污染失敗后，所以研究機構一般會通過通過購買原代細胞來節(jié)約成本。細胞系的制造是精心隔離、質量控制、測試、合格、嚴格特征化的細胞和培養(yǎng)基來實現(xiàn)的 。另一方面，非標準方法會對表型不一致、污染、生長不良、重復、無效結果和錯誤數(shù)據(jù)造成風險，所有這些都會帶有大量的人員成本。不適當?shù)募夹g和未優(yōu)化的培養(yǎng)基也會導致細胞死亡和分離物中不需要的細胞類型。

原代細胞優(yōu)化培養(yǎng)的提示

盡管原代細胞有許多優(yōu)勢，但除非是出所周知的挑剔，否則是培養(yǎng)的挑戰(zhàn)?？捎玫馁Y源概述了使用初級單元格實現(xiàn)最佳結果的步驟。在使用細胞之前，實驗室工作人員應該審查商業(yè)產品提供的細胞特定說明。應注意確保選擇相應的、優(yōu)化的、細胞特異性的生長培養(yǎng)基、試劑和培養(yǎng)條件，這有助于保持較佳的細胞健康、行為和性能。細胞培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)板必須適用于原代細胞培養(yǎng)、表面處理，在某些情況下還可以涂有促進細胞電鍍和粘附的生物分子。

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