標(biāo)簽：搖瓶 緩沖液 微生物 種子制備

搖瓶種子即接種在搖瓶內(nèi)用于搖瓶發(fā)酵試驗或發(fā)酵罐生產(chǎn)的微生物菌種。用于接種傳代第一代的種子稱為“母瓶”，用于接種傳代第二代的種子就叫做“子瓶”。 “母瓶”和“子瓶”均可應(yīng)用在微生物發(fā)酵罐進(jìn)行規(guī)模擴(kuò)培傳代培養(yǎng)。

一、培養(yǎng)基制備
在搖瓶中進(jìn)行種子制備的主要目標(biāo)是培養(yǎng)強(qiáng)生長活性的營養(yǎng)菌體，所以在配制培養(yǎng)基階段必須以滿足菌體生長要求為目的。比如在培養(yǎng)基中添加足量的營養(yǎng)物質(zhì)，包括碳、氮源、緩沖液、無機(jī)鹽和生長因子等物質(zhì)。在培養(yǎng)基中添加緩沖液的主要作用是調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中的PH值，是培養(yǎng)基的PH環(huán)境長期處于穩(wěn)定狀態(tài)。常用的PH調(diào)節(jié)劑主要有磷酸鹽緩沖液、PBS緩沖液等。培養(yǎng)基分裝完成，封口后需要置于高壓滅菌鍋中進(jìn)行高壓滅菌。 滅菌完成后緩慢降壓，防止因氣壓驟降造成培養(yǎng)基沖擊瓶塞。

二、種子接種

在進(jìn)行搖瓶種子接種時，普遍采用的是斜面法或米孢子粒計數(shù)接入的方式。 如果采用米孢子粒計數(shù)接入接種法進(jìn)行接種的缺陷在于，接種量的一致性很難掌握，這樣容易導(dǎo)致?lián)u瓶種子的質(zhì)量穩(wěn)定性差。因此，對于接種量較為敏感的菌種，一般會采用懸液接種法進(jìn)行接種。懸液接種法是用蒸餾水將細(xì)胞或微生物孢子洗脫成為混合液，然后按固定體積數(shù)量接種在搖瓶種子培養(yǎng)基中的一種接種方法。懸液接種法增加了接種數(shù)量的均一、穩(wěn)定性。 

三、振蕩培養(yǎng) 

 搖瓶種子采用的振蕩培養(yǎng)搖床主要有旋轉(zhuǎn)式振蕩和往復(fù)式振蕩兩種。正常情況下生產(chǎn)抗生素類的企業(yè)使用較多的是旋轉(zhuǎn)式振蕩搖床。旋轉(zhuǎn)式振蕩搖床由于在主軸和從動軸間會有25mm-50mm左右的偏心距產(chǎn)生，所以在振蕩作用時更有利于氣體交換。部分特殊的微生物也會使用振蕩培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。 

四、收獲保存 

搖瓶種子在培養(yǎng)完成后盡量立即使用。如果臨時用不到的可放在4℃冰箱中保存，但是保存期以不超過3天為宜。為避免影響生產(chǎn)質(zhì)量，這類冷藏處理的種子多數(shù)用于搖瓶發(fā)酵試驗或小型發(fā)酵罐實驗，一般不直接做生產(chǎn)用種子。

五、影響搖瓶種子的質(zhì)量

影響微生物搖瓶種子質(zhì)量的因素主要有：菌體濃度、培養(yǎng)基成分、接種密度、設(shè)備轉(zhuǎn)速等。 

蘇州阿爾法阿爾法生物實驗器材有限公司十三年來一直專注于生物科學(xué)領(lǐng)域的儀器設(shè)備及實驗耗材的供應(yīng)，在蘇南市場具有較高的影響力，主要供應(yīng)細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、搖瓶、離心管、pcr管、移液槍吸頭等千余種實驗室試劑耗材，同時與80余家生產(chǎn)品牌廠商深度合作，所供應(yīng)包括搖床、生物反應(yīng)器、發(fā)酵罐、移液器、PCR儀、低溫冰箱等100多種實驗室儀器設(shè)備。

蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司成立于2008年，位于蘇州園區(qū)生物納米園（Biobay）A5幢301室。公司管理團(tuán)隊專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年，擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊與完善的售后服務(wù)體系，目前已為300余家實驗室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)，涵蓋各大高校、檢測中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個群體。提供的實驗室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱，恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀，瑞寧移液器，生物反應(yīng)器，發(fā)酵罐，超低溫冰箱，液氮罐，高壓滅菌器，超純水機(jī)，天平，離心機(jī)，離心濃縮儀、研磨機(jī)、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱，梅特勒，樂楓，搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個余廠家。