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蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司

16年專注生物實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備&耗材綜合供應(yīng)

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阿爾法構(gòu)建全服務(wù)鏈體系 尊享高于原廠服務(wù)的價(jià)值
影響細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境因素有哪些
作者: 編輯: 來(lái)源: 發(fā)布日期: 2023.01.30
信息摘要:
    細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境主要通過(guò)CO2培養(yǎng)箱、震蕩培養(yǎng)箱(即溫度、濕度、O 2和 CO 2張力)和基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基及其補(bǔ)充劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。

     細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境主要通過(guò)CO2培養(yǎng)箱、震蕩培養(yǎng)箱(即溫度、濕度、O 2和 CO 2張力)和基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基及其補(bǔ)充劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。這不僅包括碳水化合物、維生素、氨基酸、礦物質(zhì)、生長(zhǎng)因子、激素等營(yíng)養(yǎng)素的供應(yīng),還包括控制培養(yǎng)物 pH 值和細(xì)胞滲透壓等理化特性的成分。此外,固體或半固體生長(zhǎng)基質(zhì)和細(xì)胞密度分別允許細(xì)胞-基質(zhì)錨定和細(xì)胞-細(xì)胞相互作用,這進(jìn)一步控制了生理相關(guān)微環(huán)境的模擬。

  為滿足特定細(xì)胞類型的要求,市場(chǎng)上已有多種細(xì)胞培養(yǎng)基組合物,并且可以根據(jù)它們補(bǔ)充血清的水平進(jìn)行分類。

    胎牛血清 (FBS) 形式的血清通常會(huì)添加到已經(jīng)含有基于氨基酸、維生素、碳源(例如葡萄糖)和無(wú)機(jī)鹽的標(biāo)準(zhǔn)配方的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中。血清為細(xì)胞提供生長(zhǎng)因子和激素,并充當(dāng)脂質(zhì)和酶的載體,以及微量營(yíng)養(yǎng)素和微量元素的運(yùn)輸。

    然而,一些實(shí)驗(yàn)的目標(biāo)是減少基礎(chǔ)培養(yǎng)基中動(dòng)物源性因子(如血清)的補(bǔ)充,因?yàn)樗且环N不確定的成分,批次之間可能會(huì)有很大差異。它也是一種昂貴的細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品,存在對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和功能造成不良刺激或抑制作用的風(fēng)險(xiǎn),如果血清來(lái)源不可靠,可能會(huì)造成細(xì)胞污染。

     減血清或無(wú)血清培養(yǎng)基依賴于用更明確的成分減少或代替血清的配方。這通常會(huì)產(chǎn)生以生長(zhǎng)和下游實(shí)驗(yàn)應(yīng)用具有較高一致性為特征的細(xì)胞培養(yǎng)物。補(bǔ)充劑的濃度也可以根據(jù)細(xì)胞類型的具體需要進(jìn)行調(diào)整。這通常會(huì)產(chǎn)生以生長(zhǎng)和下游實(shí)驗(yàn)應(yīng)用具有更高一致性為特征的細(xì)胞培養(yǎng)物。補(bǔ)充劑的濃度也可以根據(jù)細(xì)胞類型的具體需要進(jìn)行調(diào)整。這通常會(huì)產(chǎn)生以生長(zhǎng)和下游實(shí)驗(yàn)應(yīng)用具有更高一致性為特征的細(xì)胞培養(yǎng)物。補(bǔ)充劑的濃度也可以根據(jù)細(xì)胞類型的具體需要進(jìn)行調(diào)整。

溫度、pH、CO 2 2水平

    細(xì)胞培養(yǎng)所需的溫度取決于物種的體溫和分離培養(yǎng)細(xì)胞類型的微環(huán)境。雖然大多數(shù)人類和哺乳動(dòng)物細(xì)胞系在 36–37°C 下孵育,但源自冷血?jiǎng)游锏募?xì)胞系可以在 15°C 至 26°C 之間的更寬溫度范圍內(nèi)維持。大多數(shù)CO2培養(yǎng)箱、震蕩培養(yǎng)箱在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的人類和哺乳動(dòng)物細(xì)胞系的 pH 值應(yīng)嚴(yán)格控制并保持在 7.2–7.4 的生理 pH 值。相反,一些成纖維細(xì)胞系有利于pH 7.4 和 7.7 之間稍微偏堿性的條件,而轉(zhuǎn)化細(xì)胞系更喜歡 pH 7.0 和 7.4 之間的偏酸性環(huán)境。

    通過(guò)嚴(yán)格調(diào)節(jié)和監(jiān)測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境溫度的振蕩培養(yǎng)箱,可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)的恒定溫度。隨著細(xì)胞的繁殖,它們的生長(zhǎng)需要在培養(yǎng)基中提供能量,例如以葡萄糖的形式。代謝時(shí),其副產(chǎn)物包括丙酮酸、乳酸和 CO 2。大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可以使用乳酸檢測(cè)儀進(jìn)行乳酸含量檢測(cè)。

由于 pH 值取決于 CO 2和 HCO 3 -(碳酸氫鹽)的平衡,因此向細(xì)胞培養(yǎng)基中添加基于碳酸氫鹽的緩沖液也可以平衡 CO 2濃度。

      其他 pH 緩沖液可以是有機(jī)性質(zhì)的,包括 4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸 (HEPES) (10–25 mM) 或 3-(N-嗎啉代) 丙磺酸 (MOPS) (20  mM)。

許多細(xì)胞培養(yǎng)基含有 pH 指示劑(例如,酚紅),顯示酸性(黃色)和堿性(粉紅色)條件之間的顏色范圍。此外,大氣中CO 2濃度的波動(dòng)也可以改變pH水平。因此,細(xì)胞應(yīng)在培養(yǎng)箱中培養(yǎng),該培養(yǎng)箱還允許將 CO 2張力調(diào)整至 5–7%。為了延遲 pH 值的變化,可以用其他碳源(例如 半乳糖或果糖)代替葡萄糖。雖然這會(huì)減慢細(xì)胞生長(zhǎng)的速度,但也會(huì)減少乳酸等副產(chǎn)物的積累。

     對(duì)于在低氧張力(缺氧)下模擬病理或生理?xiàng)l件的特定細(xì)胞培養(yǎng)物,建議使用可調(diào)節(jié)的 1–21% 氧濃度與氮?dú)馄胶獾娜毖跖囵B(yǎng)箱。

     蘇州阿爾法生物提供的EKF-Biosen-葡萄糖乳酸分析儀、知楚搖床、生物反應(yīng)器、CO2培養(yǎng)箱、震蕩培養(yǎng)箱、恒溫恒濕培養(yǎng)箱、細(xì)胞培養(yǎng)搖瓶等廣泛用于細(xì)胞培養(yǎng)。0512-6295610418934597460了解更多產(chǎn)品。



蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司成立于2008年,位于蘇州園區(qū)生物納米園(Biobay)A5幢301室。公司管理團(tuán)隊(duì)專注于科學(xué)儀器行業(yè)十四年,擁有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與完善的售后服務(wù)體系,目前已為300余家實(shí)驗(yàn)室提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù),涵蓋各大高校、檢測(cè)中心、科研機(jī)構(gòu)、制藥企業(yè)等13個(gè)群體。提供的實(shí)驗(yàn)室儀器主要包括振蕩培養(yǎng)箱,恒溫恒濕培養(yǎng)箱、二氧化碳培養(yǎng)箱、生化培養(yǎng)箱、霉菌培養(yǎng)箱、PCR儀,瑞寧移液器,生物反應(yīng)器,發(fā)酵罐,超低溫冰箱,液氮罐,高壓滅菌器,超純水機(jī),天平,離心機(jī),離心濃縮儀、研磨機(jī)、葡萄糖乳酸分析儀等。廠商企業(yè)授權(quán)包括知楚儀器、朗基、中科美菱,梅特勒,樂(lè)楓,搏旅、NEST、天根、奧盛在內(nèi)的80個(gè)余廠家。

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