16年專注生物實驗室儀器設備&耗材綜合供應
0512-6295610418934597460
0512-6295610418934597460
0512-62956104
人CD4 磁珠分選試劑盒 51-01-0001
人CD4磁珠分選試劑盒根據(jù)人細胞表面CD4表達從新鮮或冷凍的外周血單個核細胞(PBMCs)、白細胞分離產物或單細胞懸液中分離CD4+細胞。超順磁納米微珠表面用抗人CD4單克隆抗體進行標記，形成磁性納米顆粒。預先偶聯(lián)到納米珠上的CD4抗體可以與細胞表面表達CD4的靶細胞結合。細胞/珠混合懸浮液被加載到分選柱上，當使用分離緩沖液沖洗CD4細胞時，納米珠標記的CD4+細胞被保留在柱內，并在清洗步驟中富集。去除磁場后，目標CD4+細胞可以很容易地從柱中洗脫。
基本信息
產品規(guī)格
貨號 名稱 規(guī)格 細胞量
51-01-0001S 人CD4+磁珠分選試劑盒 1mL for up to 5 ×108 total cells
51-01-0001L 人CD4+磁珠分選試劑盒 2mL 1 mL for up to 1 ×109 total cells
產品應用從白細胞分離、PBMC或細胞培養(yǎng)中富集或去除CD4+ T細胞。分離的CD4+ T細胞可用于培養(yǎng)和擴增、流式細胞術、T細胞功能檢測等。
保存方式
保存于2-8°C。不可冷凍儲存?？煞€(wěn)定保存至標簽上的有效期(EXP.)。產品形式：生物可降解基質包被納米顆粒與抗cd4抗體提供的磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)，含有人血清白蛋白(HSA)，pH7.0-7.4
操作步驟
1. 材料準備
1.1 分選緩沖液（PBS溶液，pH 7.2，0.5%BSA and 2mM EDTA）
1.2 緩沖液
1.3 分離柱
1.4 分選磁鐵
2. 樣本制備
當使用抗凝外周血時，應采用密度梯度離心法進行分離，并使用分離緩沖液洗滌以去除干擾因子。
當使用冷凍的PBMC時，復蘇冷凍的PBMC，然后繼續(xù)執(zhí)行本方案。當發(fā)現(xiàn)死亡細胞相當多時，應用密度梯度離心法去除死亡細胞，或在培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞過夜，然后繼續(xù)執(zhí)行本方案。
相關輔助產品
貨號 產品名 規(guī)格
91-01-0001 人淋巴細胞分離液 200mL/瓶
91-01-0002 快速單個核細胞分離管 15mL/支，20支 /包，10包/箱
91-01-0003 快速單個核細胞分離管 50mL/支，10 支/包，10包/箱
詳細操作步驟請參考對應的產品說明書。
3. 磁性標記
3.1 將所需數(shù)量的細胞轉移到一個新的試管中。
3.2 細胞計數(shù).
3.3 細胞懸液、300g、10min離心，棄上清。
3.4 在每10?總細胞在80μL緩沖液中重懸單細胞懸液。
注意：需要考慮死體積，如死體積已足80uL則不需要加緩沖液。
3.5 每10?總細胞加入20μLCD4磁性微球。
3.6 混勻細胞懸液和磁珠，在冰箱中孵育30分鐘(2-8°C)。
注意：如需要鑒定純度、可在這個步驟完成以后進行鑒定抗體孵育。
3.7 洗滌，每10?細胞加入1-2mL緩沖液清洗細胞，300×g離心10分鐘。棄上清。
3.8 使用分選緩沖液，重懸細胞懸液在500uL體系。
4. 實驗耗材分選柱準備
注：以SophMag? xL Columns細胞分選柱為例（貨號：51-02-0009），其余規(guī)格分選柱所需試劑用量見產品說明書。
4.1 取一根全新的分選柱置于對應配套的磁鐵中。
4.2 取1mL分選緩沖液緩慢加入分選柱中，潤濕分選柱內部，期間避免氣泡產生和進入分選柱內部，直至分選柱后一滴液體流出。
4.3 在分選柱下放置新的試管，取操作步驟3準備的細胞懸液，緩慢加入分選柱內，等待細胞懸液后一滴流出。
4.4 取操作步驟4.3細胞懸液的試管加入3mL分選緩沖液，并充分混勻，然后加入分選柱內，直至后一滴流出。
4.5 重復操作4.4操作3次。
4.6 后加入5mL分選緩沖液于分選柱內，取出分選柱使用分選柱配套的活塞推出分選柱內目的細胞于新的試管里面。
4.7 根據(jù)下游應用對應處理。如需鑒定純度需盡快完成。
當您來到這個頁面時，您已成為我們最尊貴的客戶，蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司真誠歡迎您的到來！
0512-62956104
十四年專注于生物實驗室儀器供應
全國服務熱線
